Les critères de sélection de la pipette optimale sont aussi variés que les différents modèles proposés sur le marché. Souvent, les propriétés du milieu utilisé restreignent déjà le choix et obligent l’utilisateur à opter pour un déplacement direct. Ainsi, le milieu utilisé constitue l’un des critères les plus importants dans le choix du système de distribution approprié. Néanmoins, même au sein d’un groupe, le choix reste large et il existe généralement différents modèles qui fonctionnent tous selon un même principe.
C’est pourquoi les exigences de l’application doivent également être prises en compte. Par exemple, il convient d’examiner la fréquence de répétition d’une distribution, les récipients utilisés ou le volume nécessaire. En conséquence, un instrument doit soutenir de manière optimale l’utilisateur dans son travail; il doit être intuitif à utiliser, offrir de la sécurité et répondre de manière optimale aux exigences souhaitées.
Les explications suivantes visent à mettre en évidence les différences entre les différents instruments afin de faciliter la prise de décision.
Le milieu utilisé exerce, en particulier avec les appareils fonctionnant selon le principe du coussin d’air, une influence déterminante et peut affecter négativement la précision du dosage. De nombreux milieux peuvent rendre difficile, voire impossible, un travail précis et reproductible avec les modèles à coussin d’air :
Avec une certaine expérience et des astuces spécifiques, telles que la pipetage inversé, l’utilisation de pointes Low Retention traitées en surface, la saturation du coussin d’air plusieurs prises et distributions du milieu avant l’étape de pipetage proprement dite, ainsi qu’un travail lent, ces milieux peuvent également être utilisés partiellement avec des modèles à coussin d’air.
Le plus souvent, ce sont surtout les milieux à haute viscosité qui posent problème et rendent indispensable le passage au déplacement direct. Bien entendu, une bonne méthode de travail, comme un dosage lent, offre des possibilités d’optimisation ; toutefois, comme on peut le constater aux limites de viscosité des différents appareils, les différences sont nettes :
jusqu’à 260 mPa s
Jusqu’à 140.000 mm²/s (volume nominal 100 µl) avec Transferpettor micro
Jusqu’à 40.000 mm²/s (volume nominal 500 µl) avec Transferpettor macro
20 mPa s at 50 ml PD-Tip
260 mPa s at 5 ml PD-Tip
977 mPa s at 1.25 ml PD-Tip
Dans ces cas ou dans des situations similaires, il convient de passer à un modèle à déplacement direct. Grâce au contact direct avec le piston, l’influence du coussin d’air est supprimée et un travail exact sans perte de précision est garanti.
Outre la compatibilité avec le milieu, la plage de volumes peut constituer un autre critère de sélection de l’appareil de distribution. Les instruments comme la Transferpette®, qui doivent travailler avec une haute précision dans de petites plages de volume, ne couvrent qu’une plage de volumes limitée. Côté applicatif, il est toutefois essentiel que le volume souhaité puisse être distribué en une seule étape afin d’assurer la reproductibilité. Il convient donc d’examiner quelle plage doit être couverte et quel instrument apporte les exigences nécessaires à cet effet.
Le volume à distribuer ainsi que la fréquence de distribution sont deux critères déterminants. Dans certaines expériences, chaque échantillon doit être distribué individuellement. Dans d’autres cas, il peut être utile de distribuer un même volume plusieurs fois de suite, voire simultanément. Là encore, les possibilités sont aussi variées que les applications elles-mêmes.
Si l’application exige impérativement la distribution d’un volume unique sans risque de contamination, les pipettes monocanal, telles que la Transferpette® pro ou la Transferpette® S, sont particulièrement adaptées. C’est souvent le cas lors de la manipulation d’échantillons précieux ou de la réalisation de tests de diagnostic moléculaire. Le changement systématique des pointes de pipette, rapide et facile à effectuer, permet d’éviter efficacement le mélange des échantillons et les contaminations croisées.
Mais que faire si le liquide à manipuler n’est pas adapté à l’utilisation d’une pipette à coussin d’air ? Même pour les liquides problématiques, BRAND propose une solution permettant de travailler sans risque de contamination. Grâce à sa fonction de pipetage, le distributeur répétitif électronique HandyStep® touch se transforme en une pipette à déplacement direct pratique. Les pointes PD empêchent toute contamination et permettent de manipuler en toute sécurité même les liquides critiques.
Si vous ne devez pipeter des solutions problématiques qu’occasionnellement et que l’évitement des contaminations n’est pas prioritaire, la Transferpettor convient parfaitement. La pipette à déplacement direct, grâce à l’utilisation prolongée des embouts, peut faciliter les applications ponctuelles de routine et, par rapport à un distributeur multiple avec changement régulier des embouts, faire gagner du temps et réduire les coûts.
Si, en revanche, avec un grand nombre d’échantillons, le processus doit être simplifié et permettre de gagner du temps, il peut être pertinent de remplir plusieurs récipients ou puits en parallèle. Le prémarquage de réactifs individuels dans plusieurs puits fait gagner du temps et permet une procédure reproductible. Selon les récipients utilisés, différents systèmes peuvent être mis en œuvre et simplifier considérablement l’application. Si le client utilise des plaques au format SLAS/ANSI, les pipettes multicanaux jusqu’au robot de pipetage Liquid Handling Station constituent une solution idéale pour remplir plusieurs puits en parallèle. Les entraxes correspondent exactement à ce format, de sorte que 8 ou 12 puits peuvent être remplis de manière fiable en parallèle. Avec la Transferpette® electronic, il est également possible, selon le volume souhaité, de remplir plusieurs rangées voire des plaques entières.
La situation se complique lorsque les récipients souhaités ne correspondent pas à un format SLAS/ANSI standard. Les systèmes multicanaux peuvent alors difficilement être utilisés. BRAND propose également des solutions pratiques pour cela : avec la Transferpette® electronic en mode distribution, la HandyStep® S ou la HandyStep® touch/touch S, une distribution multiple continue dans chaque récipient est possible. Selon la complexité de l’application, cela va de la distribution manuelle à des séries complexes avec la HandyStep® touch S. Ici aussi, la charge de travail peut être fortement réduite et une distribution sûre et précise est assurée.
Les tableaux récapitulatifs suivants résument les critères décrits précédemment et constituent un guide pratique pour choisir la pipette adaptée à votre application.
Pipette à coussin d’air
0,1 µl – 10 ml
Distribution unique
Pipette à coussin d’air
0,5 µl – 300 µl
Distributions multiples en parallèle
Pipette à coussin d’air
0,5 µl – 1.250 µl
Distributions multiples en parallèle
Pipette à coussin d’air
0,5 µl – 5 ml
Dosage pas à pas possible
Pipette à coussin d’air
0,5 µl – 300 µl
Multiple deliveries in parallel; Step-by-step dispensing possible
Pipette à déplacement direct
1 µl – 10 ml
Distribution unique
Distributeur multiple / déplacement direct
2 µl – 5 ml
Dosage pas à pas possible
Distributeur multiple / déplacement direct
1 µl – 50 ml
Dosage pas à pas possible; reproduction de séquences de dosage complexes; distribution unique également en mode pipetage