Menu
BRAND. For lab. For life.®

PCR & qPCR

Réaction de polymérisation en chaîne

Qu'entend-on par PCR et qPCR

La réaction de polymérisation en chaîne (PCR = Polymerase-Chain-Reaction) est un processus enzymatique pour l’amplification in vitro de la substance héréditaire (ADN). Elle est constituée des trois étapes de dénaturation, d’hybridation et d’élongation. La PCR compte parmi les méthodes standard de quasiment tous les laboratoires Life Science. Le processus est utilisé pour un grand nombre d’applications, telles que le clonage ADN, le diagnostic de maladies héréditaires ou infectieuses, l’analyse fonctionnelle de gènes, les tests de paternité ou les analyses judiciaires.

 

Des variantes encore plus sensibles sont ainsi développées en permanence. L'une des principales variantes reste encore et toujours la qPCR (PCR quantitative). Cette méthode donne des informations sur la quantité d’ADN amplifié. BRAND offre des articles consommables PCR en qualité de salle blanche pour des applications PCR et qPCR exigeantes pour lesquelles la qualité et la pureté sont décisives. La surveillance en direct de notre salle blanche validée de classe ISO 8 et le haut niveau d’automatisation garantissent la pureté des produits PCR de BRAND. Des laboratoires indépendants, homologués selon l’ISO 17 025, contrôlent nos articles PCR concernant l’absence d’ADN, de DNase, de RNase et d’endotoxines / de pyrogènes.

 

Vous trouverez de plus amples informations à ce propos ci-dessous à la section Niveaux de qualité BIO-CERT(R)

Vue d’ensemble des produits PCR & qPCR

Niveau de qualité BIO-CERT® pour votre application

Les produits BIO-CERT® de BRAND satisfont à des exigences de qualité élevées et offrent des niveaux de qualité adaptés à l’application correspondante. En plus du label général de qualité certifiée, il existe des niveaux de qualité spéciaux pour PCR, culture cellulaire et Liquid Handling. Vous trouverez ainsi facilement et rapidement les produits BIO-CERT® adaptés à votre application.

Niveau de qualité BIO-CERT® pour votre application


Plus d'informations sur les autres niveaux de qualité BIO-CERT® de BRAND

Tubes PCR pour volumes d’échantillons petits à moyens

Les bonnes premières amorces, les réactifs corrects, la température optimale d’hybridation et la durée idéale des différentes étapes PCR sont des exigences auxquelles chaque utilisateur est confronté pour l’établissement de son PCR. Pour que la réaction PCR soit stable et qu’aucune complication n’apparaisse dans la routine ultérieure, il est important d’appliquer la méthode optimale. Il faut donc réaliser de nombreux essais préalables pour vérifier l’influence des différents paramètres sur la PCR individuelle.
BRAND offre une vaste gamme de tubes individuels PCR et de bandes PCR. Le choix des produits permet un travail optimal et économique même avec un petit
nombre d’échantillons.

Tubes individuels PCR

Les tubes individuels PCR de BRAND avec un volume de 0,2 et 0,5ml sont la solution efficace pour les volumes d’échantillons petits et moyens. Les tubes particulièrement fins et réguliers garantissent pour les PCR un transfert optimal de la température et empêchent fiablement l’évaporation grâce à une fermeture optimale. Vous obtenez ainsi des résultats concluants, même avec de petits volumes d’échantillons.

Bandes PCR

Pour les volumes d'échantillons moyens, les bandes PCR de 8 et 12 offrent une solution flexible pour vos PCR ou qPCR. Vous avez le choix : couvercle bombé pour une pression supplémentaire à travers le couvercle du thermocycleur ou couvercle plat pour la qPCR. Les bandes de couvercles attachés peuvent être ouverts et fermés à une main, tandis que les bandes de couvercles et de films séparés font leurs preuves dans l’automatisation car les couvercles ne peuvent pas gêner le robot.

PCR Streifen

Plaques PCR pour volumes d’échantillons moyens à grands

L’établissement croissant de nouvelles méthodes PCR est également associé à l’augmentation du nombre d’examens réalisés. La PCR fait partie des processus standard dans de nombreux domaines. En plus des processus avec un volume d’échantillons moyen, les applications à haut débit gagnent aussi de plus en plus en importance afin d’économiser du temps et des coûts. Pour surmonter le volume croissant d’échantillons, une manipulation simple et sûre est indispensable. On recherche l'optimisation des processus et la réduction de la consommation de matériels et de réactifs.


Avec sa vaste gamme de produits pour les plaques PCR, BRAND offre les consommables parfaits pour l’analyse à haut débit. Les épaisseurs de paroi ultra-fines, les surfaces lisses pour éviter les interactions et les différentes couleurs et formes sont des conditions idéales pour couvrir un grand nombre d’applications et d’appareils. L’utilisation dans tous les cycleurs courants est garantie par le format ANSI/SLAS standardisé.

Comparaison des plaques PCR

Standard ou low profile ?

  • Profil standard : ces tubes sont adaptés à la plupart des thermocycleurs classiques, aux systèmes de détection PCR en temps réels et aux séquenceurs.
  • Low profile : l’espace réduit au-dessus de la PCR réduit l’évaporation. Les conditions de réaction pendant le thermocyclage, en particulier en cas de petits volumes (≥ 20 μl), restent plus constantes que dans des tubes avec profil standard. Simultanément, ces tubes offrent des avantages pour l’apport de lumière en cas d’essais de fluorescence, de petits volumes et d’applications Fast-PCR.

Sans cadre, demi cadre, cadre entier

  • Les plaques PCR sans cadre sont adaptées à quasiment tous les thermocycleurs courants.
  • Les plaques PCR avec demi cadre sont très facile à inscrire ou à pourvoir d’un code barre.
  • Les plaques PCR avec cadre entier sont particulièrement rigides et ainsi parfaitement adaptées aux système de pipetage automatiques.

Plaque PCR et thermocycleur parfaitement adaptés l’un à l’autre.

Vous trouverez chez BRAND les consommables adaptés à tous les thermocylceurs courants de marques connues, telles que Applied Biosystems®, Biorad® ou Peqlab®. Notre tableau de compatibilité vous fournit une vue d’ensemble des consommables BRAND PCR adaptés à votre thermocycleur.

Tableau de compatibilité par thermocycleur

Code-barres

Sur demande, nous codons vos plaques PCR avec un code-barres individuel, par ex. avec les types Code 39 (standard), Matrix ou Interleaved 2of5. Les processus en laboratoire sont ainsi encore plus efficaces grâce à la traçabilité automatique des échantillons. Pour utiliser notre service, veuillez renseigner le formulaire en ligne sur www.brand.de/barcode.

Tubes et plaques PCR

Possibilités de fermeture pour articles PCR

Une fermeture sûre des échantillons est indispensable pour les protéger contre la contamination et l’évaporation pendant la PCR elle-même et lors des mesures suivantes. L’étanchéité correcte doit être choisie de manière appropriée au type de test PCR réalisé et au tube PCR utilisé. Pour déterminer par ex. des valeurs fiables lors de la PCR en temps réel, des feuilles ultra-transparentes sont nécessaires car la mesure est réalisée directement dans le cycleur.
En plus du choix de la bonne option de fermeture, la manipulation joue également un rôle important pour la protection efficace de vos échantillons. Film ou bandes de bouchon : BRAND offre la fermeture optimale pour chaque application. Il existe même des options de fermeture confortables pour les volumes d’échantillons particulièrement petits.

Deckelstreifen

Bandes de bouchon PCR

Avec des bandes de bouchon PCR, vous fermez les bandes et les plaques PCR avec 24, 48 et 96 puits en toute fiabilité et vous protégez ainsi vos échantillons efficacement contre l’évaporation et les contaminations.

Films de fermeture

Que vous utilisiez un PCR standard, qPCR ou Digital Droplet PCR, le matériel de départ est toujours précieux et les volumes faibles. Afin de protéger les échantillons et de conserver simultanément la sensibilité, les échantillons PCR doivent être parfaitement fermés.

Verschlussfolie PCR

Options de fermeture PCR

Bande de film polyester, adhésive, pour PCR, qPCR et stockage

Si les plaques PCR doivent être scellées en toute sécurité, des films d'étanchéité autoadhésifs sont disponibles. Ces feuilles de film sont faciles à appliquer sur les plaques et à…

Palette d’étanchéité pour plaques

PE. Pour faciliter l'application en toute sécurité des films autoadhésifs. La pale d'étanchéité…

Barrette de 12 bouchons, bombés, PP, BIO-CERT® PCR QUALITY, transparents

PP. 8 capuchons connectés. Les bouchons convexes, plats ou…

Conseils et astuces pour PCR

Plus les volumes d’échantillons sont petits, plus il faut éviter les pertes par évaporation. Grâce au grand choix de films et de bandes, vous obtenez toujours un système parfaitement adapté pour la fermeture en toute sécurité de vos plaques et tubes PCR. Vous en apprendrez plus dans notre Application Note.

Nos racks PCR conviennent à la préparation des échantillons, à la conservation et au stockage de tubes 0,2 ml individuels, de bandes de 8 ou de 12 ainsi que de plaques PCR à 96 puits. Le mini cooler PCR correspondant conserve les échantillons à 4 °C pendant env. 3 heures. La couleur du gel isolant passe de violet à rose à 7 °C.

Informations pour les utilisateurs

Pour l’incubation à températures plus élevées, nous recommandons d’utiliser des tubes de réaction avec verrouillage du couvercle pour éviter que les tubes sautent.


Attention : l’accélération centrifuge relative (RCF) dépend du rayon du rotor et de la vitesse de rotation (tr/min) de la centrifugeuse !


Formule de conversion générale
g = RZB = ((tr/min)/1000)2 · r · 1.118


Indice g :     accélération gravitationnelle
RZB:          accélération centrifuge relative
                   (correspond à l’indice g)
r:                rayon du rotor
tr/min:     rotation du rotor par minute (vitesse de rotation)

Nous déconseillons l’autoclavage de tubes de réaction. Les autoclaves peuvent être une source de contamination des produits jetables.

 

Avantages du PP

  • Grande résistance aux produits chimiques : les tubes de réaction peuvent notamment être utilisés avec DMSO et d’autres produits chimiques agressifs.
  • Bonne résistance à la température : les tubes restent stables même en cas de températures élevées, en général ces produits sont autoclavables à 121 °C (2 bar) selon la DIN EN 285.
  • Humidification minimale : les tubes PCR, tubes de réaction et pointes ne présentent pas de film résiduel, le matériau est biologiquement inerte, c’est-à-dire que les biomolécules n’adhèrent pas aux surfaces.

Les tubes de réaction ne sont pas recommandés pour un entreposage de longue durée. Nous recommandons pour cela des tubes de réaction avec couvercle vissé ou cryotubes.

Notes d’application PCR

PCR plates support reliable evaporation protection

Note d'application | pdf | 6 MB

Characterisation of antibodies with BRAND PCR plates

Note d'application | pdf | 1 MB

Data sheet PCR 96-well-plate EN

Note d'application | pdf | 4 MB

Data sheet PCR 96-well-plate DE

Note d'application | pdf | 4 MB

choisi

Plus les volumes d’échantillons sont petits, plus il faut éviter les pertes par évaporation. Grâce au grand choix de films et de bandes, vous obtenez toujours un système parfaitement adapté pour la fermeture en toute sécurité de vos plaques et tubes PCR. Vous en apprendrez plus dans notre Application Note.

Que ce soit pour des tubes PCR individuels lors d’un essai de protocole ou pour des essais à grand débit de processus standardisés avec des plaques à 96 puits ou à 384 puits, le choix du bon consommable permet d’économiser des coûts et du temps et de réduire parallèlement les quantités de déchets. Plus d’informations sur notre vaste gamme de consommables.

Les produits PCR blancs de BRAND fournissent de bien meilleurs résultats pour qPCR que les tubes transparents. En association avec les surfaces lisses, la couleur blanche assure une réflexion optimale des signaux de fluorescence.

Nein. Das bei der quantitativen Real-Time PCR entstehende Fluoreszenzsignal kann nur durch flache hochtransparente Deckel detektiert werden. Die für quantitative Real-Time PCR Anwendungen geeigneten BRAND PCR-Produkte sind in den Verkaufsunterlagen mit dem Kürzel q!PCR versehen.

Non, il n’est pas autoclavable.

Les articles PCR jetables sont fabriqués dans les conditions ultra-modernes de salle blanche, en polypropylène pur de grande qualité, sans ajout de produits additifs, et sont emballés automatiquement. Des laboratoires indépendants contrôlent régulièrement les produits concernant l’absence d’ADN, de RNase et de DNase.

Les feuilles de fermeture PCR sont autoclavables à +121 °C (2 bar, selon la DIN EN 285). Cependant, la feuille de fermeture en silicone (n° cat. 781408) est uniquement autoclavable ~ 5 x en raison du retrait de matériau.

Les articles PCR jetables sont fabriqués en PP. Le PP peut être stérilisé à la vapeur dans l’autoclave à 121°C (2 bar, conformément à la DIN EN 285). En raison de son épaisseur de paroi très fine et du fait que l’autoclave peut représenter une source de contamination, nous ne recommandons cependant pas cette forme de stérilisation pour ce groupe de produits.

La nouvelle gamme de produits PCR blancs de BRAND offre pour les applications PCR en temps réel des résultats largement meilleurs que les bandes ou plaques transparentes de 8. Les différents produits de cette gamme sont colorés uniformément au Ti02 (dioxyde de titane) afin d’obtenir une réflexion plus efficace des signaux de fluorescence en association avec les surfaces lisses.