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PCR & qPCR

Réaction de polymérisation en chaîne

Qu'entend-on par PCR et qPCR

La réaction de polymérisation en chaîne (PCR = Polymerase-Chain-Reaction) est un processus enzymatique pour l’amplification in vitro de la substance héréditaire (ADN). Elle est constituée des trois étapes de dénaturation, d’hybridation et d’élongation. La PCR compte parmi les méthodes standard de quasiment tous les laboratoires Life Science. Le processus est utilisé pour un grand nombre d’applications, telles que le clonage ADN, le diagnostic de maladies héréditaires ou infectieuses, l’analyse fonctionnelle de gènes, les tests de paternité ou les analyses judiciaires.

 

Des variantes encore plus sensibles sont ainsi développées en permanence. L'une des principales variantes reste encore et toujours la qPCR (PCR quantitative). Cette méthode donne des informations sur la quantité d’ADN amplifié. BRAND offre des articles consommables PCR en qualité de salle blanche pour des applications PCR et qPCR exigeantes pour lesquelles la qualité et la pureté sont décisives. La surveillance en direct de notre salle blanche validée de classe ISO 8 et le haut niveau d’automatisation garantissent la pureté des produits PCR de BRAND. Des laboratoires indépendants, homologués selon l’ISO 17 025, contrôlent nos articles PCR concernant l’absence d’ADN, de DNase, de RNase et d’endotoxines / de pyrogènes.

 

Vous trouverez de plus amples informations à ce propos ci-dessous à la section Niveaux de qualité BIO-CERT®

Vue d’ensemble des produits PCR & qPCR

Niveau de qualité pour votre application

Les consommables pour les sciences de la vie de BRAND répondent aux normes de qualité les plus élevées et offrent des niveaux de qualité adaptés à chaque application. Tous les produits portant le niveau de qualité CERTIFIED LIFE SCIENCE QUALITY et les labels de qualité BIO-CERT® sont fabriqués à partir de matières premières pures de haute qualité et sont testés en permanence quant à leur qualité et leur fonctionnement. Outre le label général BIO-CERT® CERTIFIED QUALITY, des niveaux de qualité spécifiques sont disponibles pour la PCR, la culture cellulaire et la manipulation de liquides. Vous trouverez ainsi facilement et rapidement les produits adaptés à votre application.

 

Niveau de qualité BIO-CERT® PCR QUALITY de BRAND :

Plus d'informations sur les niveaux de qualité :

Tubes PCR pour volumes d’échantillons petits à moyens

Les bonnes premières amorces, les réactifs corrects, la température optimale d’hybridation et la durée idéale des différentes étapes PCR sont des exigences auxquelles chaque utilisateur est confronté pour l’établissement de son PCR. Pour que la réaction PCR soit stable et qu’aucune complication n’apparaisse dans la routine ultérieure, il est important d’appliquer la méthode optimale. Il faut donc réaliser de nombreux essais préalables pour vérifier l’influence des différents paramètres sur la PCR individuelle.

 

BRAND offre une vaste gamme de tubes individuels PCR et de bandes PCR. Le choix des produits permet un travail optimal et économique même avec un petit nombre d’échantillons.

Tubes individuels PCR

Les tubes individuels PCR de BRAND avec un volume de 0,2 et 0,5ml sont la solution efficace pour les volumes d’échantillons petits et moyens. Les tubes particulièrement fins et réguliers garantissent pour les PCR un transfert optimal de la température et empêchent fiablement l’évaporation grâce à une fermeture optimale. Vous obtenez ainsi des résultats concluants, même avec de petits volumes d’échantillons.

Bandes PCR

Pour les volumes d'échantillons moyens, les bandes PCR de 8 et 12 offrent une solution flexible pour vos PCR ou qPCR. Vous avez le choix : couvercle bombé pour une pression supplémentaire à travers le couvercle du thermocycleur ou couvercle plat pour la qPCR. Les bandes de couvercles attachés peuvent être ouverts et fermés à une main, tandis que les bandes de couvercles et de films séparés font leurs preuves dans l’automatisation car les couvercles ne peuvent pas gêner le robot.

PCR Streifen

Plaques PCR pour volumes d’échantillons moyens à grands

L’établissement croissant de nouvelles méthodes PCR est également associé à l’augmentation du nombre d’examens réalisés. La PCR fait partie des processus standard dans de nombreux domaines. En plus des processus avec un volume d’échantillons moyen, les applications à haut débit gagnent aussi de plus en plus en importance afin d’économiser du temps et des coûts. Pour surmonter le volume croissant d’échantillons, une manipulation simple et sûre est indispensable. On recherche l'optimisation des processus et la réduction de la consommation de matériels et de réactifs.


Avec sa vaste gamme de produits pour les plaques PCR, BRAND offre les consommables parfaits pour l’analyse à haut débit. Les épaisseurs de paroi ultra-fines, les surfaces lisses pour éviter les interactions et les différentes couleurs et formes sont des conditions idéales pour couvrir un grand nombre d’applications et d’appareils. L’utilisation dans tous les cycleurs courants est garantie par le format ANSI/SLAS standardisé.

Comparaison des plaques PCR

Standard ou low profile ?

  • Profil standard : ces tubes sont adaptés à la plupart des thermocycleurs classiques, aux systèmes de détection PCR en temps réels et aux séquenceurs.
  • Low profile : l’espace réduit au-dessus de la PCR réduit l’évaporation. Les conditions de réaction pendant le thermocyclage, en particulier en cas de petits volumes (≥ 20 μl), restent plus constantes que dans des tubes avec profil standard. Simultanément, ces tubes offrent des avantages pour l’apport de lumière en cas d’essais de fluorescence, de petits volumes et d’applications Fast-PCR.

Sans cadre, demi cadre, cadre entier

 

  • Les plaques PCR sans cadre sont adaptées à quasiment tous les thermocycleurs courants.
  • Les plaques PCR avec demi cadre sont très facile à inscrire ou à pourvoir d’un code barre.
  • Les plaques PCR avec cadre entier sont particulièrement rigides et ainsi parfaitement adaptées aux système de pipetage automatiques.
  • Les plaques PCR à cadre rigide sont dotées d'un cadre en polycarbonate solide qui garantit une manipulation sûre dans les systèmes de pipetage semi-automatiques et automatisés, ainsi qu'une protection optimale contre l'évaporation.

Plaque PCR et thermocycleur parfaitement adaptés l’un à l’autre.

Vous trouverez chez BRAND les consommables adaptés à tous les thermocylceurs courants de marques connues, telles que Applied Biosystems®, Biorad® ou Peqlab®. Notre tableau de compatibilité vous fournit une vue d’ensemble des consommables BRAND PCR adaptés à votre thermocycleur.

Tableau de compatibilité par thermocycleur

Code-barres

Sur demande, nous codons vos plaques PCR avec un code-barres individuel, par ex. avec les types Code 39 (standard), Matrix ou Interleaved 2of5. Les processus en laboratoire sont ainsi encore plus efficaces grâce à la traçabilité automatique des échantillons. Pour utiliser notre service, veuillez renseigner le formulaire en ligne sur www.brand.de/barcode.

Tubes et plaques PCR

Plaque PCR 96-puits, Rigid Frame, PC/PP, vert, cadre complet, Low Profile, puits transparent, BIO-CERT® PCR QUALITY

For medium and high sample throughput, 96-well plates from BRAND are the efficient solution for PCR and qPCR. Our Rigid Frame PCR plates have a strong polycarbonate frame to ensure safe handling in semiautomated and automated pipetting systems and optimal evaporation protection. The rigid frame also allows the use of very thin-walled wells from 100% virgin medical grade polypropylene. The uniform and thin wall thicknesses of the wells ensure rapid transfer of the temperature from the cycler to the sample, thus reducing cycle times.A number of skirt choices ensures a good fit in common thermal cyclers for efficient heat transfer. Choose between semi-skirted and fully-skirted plates. Different colors help to distinguish between the workflow steps. For qPCR, white plates are available that optimally reflect the fluorescence signals. BIO-CERT® PCR QUALITY: exempt d'ADN humain, RNase, DNase, pyrogènes et inhibiteurs de

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Set PCR 1: 50x plaque PCR, 96 puits, sans cadre, Low Profile, transparent + 50x film de fermeture (qPCR), polyester

Pour des volumes d’échantillons moyens et élevés, les plaques à 96 puits de BRAND sont la solution efficace pour vos PCR et qPCR. Elles offrent suffisamment de place pour différentes analyses et peuvent être remplies en tout confort avec des pipettes multicanales ou des robots de pipetage.Les épaisseurs de parois régulières et fines des puits assurent un transfert rapide de la température du cycleur dans l’échantillon et réduisent ainsi les temps de cycle.BRAND offre également la plaque adaptée à votre cycleur. Différentes variantes de cadre assurent une bonne adaptation dans le thermocycleur et ainsi un transfert de chaleur efficace. Les plaques sans cadre sont le premier choix pour une grande disponibilité. Vous pouvez placer un code-barres sur les plaques avec demi-cadre en vue d’une identification claire. Cela vaut également pour les plaques avec un cadre complet qui, en raison de leur rigidité, sont parfaitement adaptées à l’automatisation. Des plaques blanches qui reflètent au mieux les signaux de fluorescence sont disponibles pour la qPCR.Des films autocollants ou des bandes de couvercles ferment la plaque en toute sécurité et protègent contre les pertes dues à l’évaporation, ce qui est particulièrement important pour les petits volumes.La qualité salle blanche des consommables PCR de BRAND offre des résultats fiables. De même, les plaques 96 puits de BRAND sont produites dans des conditions contrôlées de salle blanche et correspondent ainsi aux critères de pureté de Biocert PCR clean. Les films contenus dans les sets ne sont pas contrôlés avec ces critères de pureté. BIO-CERT® PCR QUALITY: exempt d'ADN humain, RNase, DNase, pyrogènes et inhibiteurs de

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Tubes PCR, PP, 0,2 ml, BIO-CERT® PCR QUALITY, avec bouchon bombé attaché, incolores

Les tubes individuels PCR de BRAND avec un volume de 0,2 et 0,5 ml sont la solution efficace pour les petits à moyens volumes d'échantillons et vous permettent de réduire la quantité de consommables utilisés. Pour la PCR, les tubes à parois extrêmement fines assurent un transfert optimal de la température, ce qui contribue à réduire les temps de cycle. Les grandes différences de température peuvent également être atteintes très rapidement.Afin d’éviter les pertes d’échantillons par le chauffage, les couvercles scellent les tubes en toute fiabilité avec leur ajustement parfait. Vous obtenez ainsi des résultats concluants, même avec de petits volumes d’échantillons. Vous pouvez ouvrir et fermer les fermetures en toute facilité avec une faible application de force.Les tubes optionnels de différentes couleurs vous permettent de marquer vos échantillons en un coup d'œil et vous obtenez ainsi une bonne vue d’ensemble. BIO-CERT® PCR QUALITY: exempt d'ADN humain, RNase, DNase, pyrogènes et inhibiteurs de

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Barrette de 12 tubes PCR, PP, 0,2 ml, BIO-CERT® PCR QUALITY, sans bouchon, incolores

Pour les volumes d'échantillons moyens, les bandes PCR de 8 et 12 offrent une solution flexible pour vos PCR ou qPCR. Vous avez le choix : couvercle bombé pour une pression supplémentaire à travers le couvercle du thermocycleur ou couvercle plat pour la qPCR. Les bandes de couvercles attachés peuvent être ouverts et fermés à une main, tandis que les bandes de couvercles et de films séparés font leurs preuves dans l’automatisation car les couvercles ne peuvent pas gêner le robot. Quelle que soit la fermeture choisie : Toutes les variantes scellent les microtubes en toute fiabilité et protègent ainsi vos échantillons efficacement contre l’évaporation et la contamination.  Les épaisseurs de parois particulièrement fines permettent un chauffage et un refroidissement rapides des échantillons. Vous atteignez ainsi des temps de cycle

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Possibilités de fermeture pour articles PCR

Une fermeture sûre des échantillons est indispensable pour les protéger contre la contamination et l’évaporation pendant la PCR elle-même et lors des mesures suivantes. L’étanchéité correcte doit être choisie de manière appropriée au type de test PCR réalisé et au tube PCR utilisé. Pour déterminer par ex. des valeurs fiables lors de la PCR en temps réel, des feuilles ultra-transparentes sont nécessaires car la mesure est réalisée directement dans le cycleur.
En plus du choix de la bonne option de fermeture, la manipulation joue également un rôle important pour la protection efficace de vos échantillons. Film ou bandes de bouchon : BRAND offre la fermeture optimale pour chaque application. Il existe même des options de fermeture confortables pour les volumes d’échantillons particulièrement petits.

Deckelstreifen

Bandes de bouchon PCR

Avec des bandes de bouchon PCR, vous fermez les bandes et les plaques PCR avec 24, 48 et 96 puits en toute fiabilité et vous protégez ainsi vos échantillons efficacement contre l’évaporation et les contaminations.

Films de fermeture

Que vous utilisiez un PCR standard, qPCR ou Digital Droplet PCR, le matériel de départ est toujours précieux et les volumes faibles. Afin de protéger les échantillons et de conserver simultanément la sensibilité, les échantillons PCR doivent être parfaitement fermés.

Verschlussfolie PCR

Options de fermeture PCR

Bande de film polyester, adhésive, pour PCR, qPCR et stockage

Pour PCR standard, qPCR ou Digital Droplet PCR, le matériau de départ est dans tous les cas précieux et les volumes bas. Les échantillons PCR doivent être scellés en toute sécurité pour protéger les échantillons et conserver simultanément la

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Palette d’étanchéité pour plaques

PE. Pour faciliter l'application en toute sécurité des films autoadhésifs. La pale d'étanchéité facilite la fixation du film sur la plaque avec une pression uniforme. Spécialement adapté pour les plaques à bord

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Barrette de 12 bouchons, bombés, PP, BIO-CERT® PCR QUALITY, transparents

Les barrettes de bouchons PCR permettent la fermeture en toute fiabilité des bandes PCR et des plaques avec 24, 48 et 96 puits et protègent ainsi vos échantillons efficacement contre l’évaporation et les contaminations. Les barrettes de bouchons sont parfaitement adaptées dans leur forme aux bandes et aux plaques* PCR de BRAND et peuvent ainsi être ouvertes et fermées en toute facilité. Pour éviter les contaminations, les barrettes de bouchons disposent de deux languettes de maintien latérales pour le positionnement précis avant la fermeture ainsi que d’une petite patte pour l’ouverture sur chaque bouchon. Vous évitez ainsi le contact avec l'intérieur du bouchon.Les barrettes de bouchons plates, très transparentes, conviennent parfaitement à la qPCR, car elles sont compatibles avec la mesure à travers le bouchon. En cas de barrettes de bouchons bombées, les thermocycleurs exercent une plus grande force, sans capteur de pression, et augmentent ainsi l’effet d’étanchéité.Grâce à la production en salle blanche, toutes les barrettes de bouchons sont exemptes de DNase, ADN, RNase et endotoxines.   BIO-CERT® PCR QUALITY: exempt d'ADN humain, RNase, DNase, pyrogènes et inhibiteurs de

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Film de fermeture, polyester, très transparent, sensible à la pression, pour ELISA et qPCR

Pour PCR standard, qPCR ou Digital Droplet PCR, le matériau de départ est dans tous les cas précieux et les volumes bas. Les échantillons PCR doivent être scellés en toute sécurité pour protéger les échantillons et conserver simultanément la

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Conseils et astuces pour PCR

Plus les volumes d’échantillons sont petits, plus il faut éviter les pertes par évaporation. Grâce au grand choix de films et de bandes, vous obtenez toujours un système parfaitement adapté pour la fermeture en toute sécurité de vos plaques et tubes PCR. Vous en apprendrez plus dans notre Application Note.

Nos racks PCR conviennent à la préparation des échantillons, à la conservation et au stockage de tubes 0,2 ml individuels, de bandes de 8 ou de 12 ainsi que de plaques PCR à 96 puits. Le mini cooler PCR correspondant conserve les échantillons à 4 °C pendant env. 3 heures. La couleur du gel isolant passe de violet à rose à 7 °C.

Informations pour les utilisateurs

Pour l’incubation à températures plus élevées, nous recommandons d’utiliser des tubes de réaction avec verrouillage du couvercle pour éviter que les tubes sautent.


Attention : l’accélération centrifuge relative (RCF) dépend du rayon du rotor et de la vitesse de rotation (tr/min) de la centrifugeuse !


Formule de conversion générale
g = RZB = ((tr/min)/1000)2 · r · 1.118


Indice g :     accélération gravitationnelle
RZB:          accélération centrifuge relative
                   (correspond à l’indice g)
r:                rayon du rotor
tr/min:     rotation du rotor par minute (vitesse de rotation)

Nous déconseillons l’autoclavage de tubes de réaction. Les autoclaves peuvent être une source de contamination des produits jetables.

 

Avantages du PP

  • Grande résistance aux produits chimiques : les tubes de réaction peuvent notamment être utilisés avec DMSO et d’autres produits chimiques agressifs.
  • Bonne résistance à la température : les tubes restent stables même en cas de températures élevées, en général ces produits sont autoclavables à 121 °C (2 bar) selon la DIN EN 285.
  • Humidification minimale : les tubes PCR, tubes de réaction et pointes ne présentent pas de film résiduel, le matériau est biologiquement inerte, c’est-à-dire que les biomolécules n’adhèrent pas aux surfaces.

Les tubes de réaction ne sont pas recommandés pour un entreposage de longue durée. Nous recommandons pour cela des tubes de réaction avec couvercle vissé ou cryotubes.

Notes d’application PCR

Characterisation of antibodies with BRAND PCR plates

Note d'application | pdf | 1 MB

PCR plates support reliable evaporation protection

Note d'application | pdf | 6 MB

Plus les volumes d’échantillons sont petits, plus il faut éviter les pertes par évaporation. Grâce au grand choix de films et de bandes, vous obtenez toujours un système parfaitement adapté pour la fermeture en toute sécurité de vos plaques et tubes PCR. Vous en apprendrez plus dans notre Application Note.

Que ce soit pour des tubes PCR individuels lors d’un essai de protocole ou pour des essais à grand débit de processus standardisés avec des plaques à 96 puits ou à 384 puits, le choix du bon consommable permet d’économiser des coûts et du temps et de réduire parallèlement les quantités de déchets. Plus d’informations sur notre vaste gamme de consommables.

Non. Le signal fluorescent généré lors de la PCR quantitative en temps réel ne peut être détecté que par des couvercles plats hautement transparents. Les produits BRAND PCR adaptés aux applications de PCR quantitative en temps réel sont identifiés par l'abréviation q!PCR dans les documents de vente.

Non, il n’est pas autoclavable.

Les articles PCR jetables sont fabriqués dans les conditions ultra-modernes de salle blanche, en polypropylène pur de grande qualité, sans ajout de produits additifs, et sont emballés automatiquement. Des laboratoires indépendants contrôlent régulièrement les produits concernant l’absence d’ADN, de RNase et de DNase.

Les articles PCR jetables sont fabriqués en PP. Le PP peut être stérilisé à la vapeur dans l’autoclave à 121°C (2 bar, conformément à la DIN EN 285). En raison de son épaisseur de paroi très fine et du fait que l’autoclave peut représenter une source de contamination, nous ne recommandons cependant pas cette forme de stérilisation pour ce groupe de produits.

La nouvelle gamme de produits PCR blancs de BRAND offre pour les applications PCR en temps réel des résultats largement meilleurs que les bandes ou plaques transparentes de 8. Les différents produits de cette gamme sont colorés uniformément au Ti02 (dioxyde de titane) afin d’obtenir une réflexion plus efficace des signaux de fluorescence en association avec les surfaces lisses.