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PCR & qPCR

Reacción en cadena de la polimerasa

¿Qué es PCR y qPCR?

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR = Polymerase-Chain-Reaction) es un procedimiento que depende de las enzimas para amplificar el material genético (ADN) in vitro. Consta de tres pasos: desnaturalización, alineación y extensión. La PCR es un método estándar en casi todos los laboratorios de ciencias biológicas. El procedimiento se utiliza para diversas aplicaciones, como la clonación de ADN, el diagnóstico de enfermedades hereditarias o infecciosas, el análisis funcional de los genes, las pruebas de paternidad o el análisis forense.

 

Por este motivo, se desarrollan continuamente nuevas variantes aún más sensibles. Una de las variantes más importantes es la qPCR (PCR cuantitativa). Este método brinda información sobre la cantidad de ADN amplificado. BRAND ofrece consumibles para PCR con calidad de sala blanca para aplicaciones exigentes de PCR y qPCR en las cuales la calidad y la pureza son determinantes. El monitoreo de la vida útil de nuestra sala blanca con validación de clase ISO 8 y el alto grado de automatización garantizan la pureza de los productos para PCR de BRAND. Laboratorios independientes con acreditación ISO 17025 comprueban la ausencia de ADN, DNasa, RNasa y endotoxinas/pirógenos en nuestros productos para PCR.

 

Más información al respecto en el párrafo inferior Niveles de calidad BIO-CERT(R).

Síntesis de productos para PCR y qPCR

Nivel de calidad BIO-CERT® para sus aplicaciones

Los productos BIO-CERT® de BRAND cumplen con elevados estándares de calidad y ofrecen el nivel de calidad adaptado para cada aplicación. Además de la etiqueta general de calidad certificada, existen niveles de calidad especiales para la PCR, el cultivo celular y la manipulación de líquidos. De este modo, encontrará de forma simple y rápida el producto BIO-CERT® adecuado para su aplicación.

La calidad PCR BIO-CERT® destaca por las siguientes cualidades:


Descubra más acerca de los demás niveles de calidad BIO-CERT® de BRAND

Recipientes para PCR para volúmenes de muestra pequeños y medios

El partidor y el reactivo correctos, la temperatura de recocido óptima y la duración ideal de cada paso de la PCR, son requisitos a los que todo usuario se debe enfrentar al establecer su PCR. Para que la reacción PCR funcione de forma estable y no surjan complicaciones en un proceso de rutina posterior, es importante lograr el método ideal. De este modo, se deben realizar múltiples ensayos previos para comprobar la influencia de los más diversos parámetros en cada PCR individual.
BRAND ofrece una amplia gama de recipientes individuales para PCR y tiras para PCR. La selección de productos permite trabajar de manera ideal y económica, incluso con una pequeña
cantidad de muestras.

Recipientes individuales para PCR

Los recipientes individuales para PCR de BRAND con un volumen de 0,2 y 0,5 ml son la solución eficiente para volúmenes de muestra pequeños y medios. Los recipientes con paredes extradelgadas y uniformes aseguran una transferencia ideal de la temperatura durante el PCR y, gracias al cierre óptimo, se evita la evaporación de forma fiable. De esta forma, se logran resultados significativos, incluso con volúmenes de muestra pequeños.

Tiras para PCR

Las tiras para PCR de 8 y 12 unidades ofrecen una solución flexible para PCR o qPCR en caso de volúmenes de muestra medios. Es posible elegir entre una tapa cóncava para mayor presión a través de la tapa del termociclador o una tapa plana para qPCR. Las tiras de tapas unidas se pueden abrir y cerrar de manera sencilla con una mano, mientras que las tiras separadas de tapas y films demuestran su potencial en la automatización, dado que las tapas no pueden obstaculizar el robot.

Placas para PCR para volúmenes de muestra medianos y grandes

Con el creciente establecimiento de nuevos métodos de PCR, también aumenta de forma constante el número de pruebas realizadas. El PCR es un proceso estándar en muchos sectores. Además de los procesos con volúmenes de muestra medios, las aplicaciones de grandes volúmenes son cada vez más importantes para ahorrar tiempo y costes. Para hacer frente a los crecientes volúmenes de muestras, es esencial una manipulación sencilla y segura. El objetivo es optimizar el proceso y reducir el consumo de materiales y reactivos.


Con la amplia gama de productos en el ámbito de las placas para PCR, BRAND ofrece consumibles ideales para el análisis de grandes volúmenes. Las paredes con espesores extrafinos, las superficies lisas para evitar interacciones y los diferentes colores y formas son requisitos ideales para cubrir una amplia gama de aplicaciones y equipos. El empleo en todos los cicladores convencionales se garantiza mediante el formato estandarizado ANSI/SLAS.

Comparación de placas para PCR

¿Perfil estándar o bajo?

  • Perfil estándar: estos recipientes son adecuados para la mayoría de los termocicladores clásicos, los sistemas de detección de PCR en tiempo real y los secuenciadores.
  • Perfil bajo: la evaporación se reduce debido al reducido espacio de aire por encima de la preparación de PCR. Como resultado, las condiciones de reacción durante el termociclaje se mantienen más constantes que en los recipientes con perfil estándar, en especial, para las preparaciones con volúmenes pequeños (≥ 20 μl). A su vez, estos recipientes ofrecen ventajas para el ingreso de luz en los ensayos de fluorescencia y las aplicaciones de PCR rápidas y de bajo volumen.

Sin marco, medio marco, marco completo

  • Las placas para PCR sin marco son adecuadas para casi todos los termocicladores convencionales.
  • Las placas para PCR con medio marco se pueden rotular o etiquetar con un código de barras de forma muy sencilla.
  • Las placas para PCR con marco completo son muy rígidas y, por este motivo, resultan ideales para los sistemas de pipeteado automáticos.

Placa para PCR y termociclador perfectamente adaptados entre sí.

En BRAND, encontrará los consumibles adecuados para todos los termocicladores habituales de las marcas conocidas como Applied Biosystems®, Biorad® o Peqlab®. En nuestra tabla de compatibilidad puede comprobar de un vistazo qué consumible para PCR de BRAND es el adecuado para su termociclador.

Tabla de compatibilidad del termociclador

Código de barras

De manera opcional, codificamos sus placas para PCR con un código de barras individual, por ejemplo, con los códigos 39 (estándar), Matrix o Interleaved 2of5. De este modo, los procesos en el laboratorio se vuelven más eficientes mediante el seguimiento automático de las muestras. Para utilizar nuestro servicio, complete el formulario en línea en www.brand.de/barcode.

Recipientes y placas para PCR

Opciones de cierre para los artículos para PCR

El cierre seguro de las muestras es esencial para protegerlas de la contaminación y la evaporación durante la propia PCR y durante las mediciones posteriores. Se debe seleccionar el sellado correcto para que coincida con el tipo de ensayo de PCR realizado y el recipiente de PCR utilizado. Para determinar valores fiables en la PCR en tiempo real, por ejemplo, se necesitan films muy transparentes, dado que la medición se realiza directamente en el ciclador.
Además de la selección de la opción de cierre correcta, la manipulación también desempeña un papel importante en la protección eficaz de las muestras. Ya sean films o tiras de tapas: BRAND ofrece el sellado ideal para cada aplicación. Existen opciones de cierre cómodas, incluso para cantidades de muestras muy pequeñas.

Tiras de tapas para PCR

Con las tiras de tapas para PCR se pueden cerrar las tiras para PCR y las placas de 24, 48 y 96 pocillos de manera fiable, a la vez que protegen las muestras de forma efectiva contra la evaporación y la contaminación.

Films de sellado

Ya sea para PCR estándar, qPCR o ddPCR, en todos los casos el material básico es valioso y el volumen escaso. A fin de proteger las muestras y, al mismo tiempo, mantener la sensibilidad, las muestras para PCR se deben cerrar de manera óptima.

Opciones de cierre para PCR

Tiras de film, poliéster, autoadhesivas, para PCR, qPCR y almacenamiento

Whether standard PCR, qPCR or digital droplet PCR, the source material is always valuable and the volume always low. To protect samples and maintain their sensitivity at…

Espátula para presionar films de sellado autoadhesivos

PE. To securely and easily apply self-adhesive films. The sealing paddle helps to…

Tiras de 12 tapas, cóncavas, PP, BIO-CERT® PCR QUALITY, incoloro

With PCR cap strips you can seal PCR strips and plates with 24, 48, and…

Consejos y trucos de PCR

Cuanto más pequeños son los volúmenes de las muestras, más importante es evitar las pérdidas por evaporación. Gracias a la gran selección de diferentes films y tiras, siempre tendrá un sistema perfectamente coordinado para cerrar de forma segura sus placas y recipientes para PCR. Obtenga más información en nuestras notas de aplicación.</

Tanto si se trata de recipientes individuales para PCR para pruebas de protocolo o análisis de grandes volúmenes de procesos estandarizados con placas de 96 o 384 pocillos: la elección de los consumibles adecuados ahorra tiempo y dinero y minimiza la cantidad de residuos. Obtenga más información sobre nuestra amplia gama de consumibles.

En la qPCR, los productos para PCR blancos de BRAND ofrecen resultados considerablemente mejores que los recipientes transparentes. En combinación con las superficies lisas, la coloración blanca garantiza una reflexión óptima de las señales de fluorescencia.

Nuestras gradillas para PCR son adecuadas para preparar muestras, guardar y almacenar recipientes individuales de 0,2 ml, tiras de 8 o 12 unidades y placas para PCR de 96 pocillos. El minirrefrigerador adecuado para PCR mantiene las muestras a 4 °C durante unas 3 horas. El gel aislante cambia de color violeta a rosa a 7 °C.

Información para el usuario

Para la incubación a altas temperaturas recomendamos utilizar recipientes de reacción con bloqueo en la tapa a fin de evitar que el recipiente se abra de manera repentina.


Atención: la aceleración centrífuga relativa (ACR) depende del radio del rotor y de la velocidad de giro (r. p. m.) de la centrífuga.


Fórmula general
g = ACR = ((r. p. m.)/1000)2 · r · 1.118


Valor g:     aceleración gravitatoria
ACR:          aceleración centrífuga relativa
                   (se corresponde con el valor g)
r:                radio del rotor
r. p. m.:     revoluciones por minuto del rotor (velocidad de giro)

No recomendamos esterilizar en autoclave los recipientes de reacción. Los autoclaves pueden ser una fuente de contaminación para los productos desechables.

 

Ventajas del PP

  • Alta resistencia a productos químicos: los recipientes de reacción se pueden utilizar, entre otros, con DMSO y otras sustancias químicas agresivas.
  • Buena resistencia a las temperaturas: los recipientes permanecen estables ante altas temperaturas. Por lo general, estos productos se pueden estabilizar en autoclave a 121 °C (2 bares), según DIN EN 285.
  • Humectación mínima: los recipientes de PCR, los recipientes de reacción y las puntas no presentan una humectación residual, el material es biológicamente inerte, es decir, las biomoléculas no se adhieren a las superficies.

Los recipientes de reacción no se recomiendan para el almacenamiento prolongado. Para esto, recomendamos recipientes de reacción con tapa roscada o tubos criogénicos.

Notas de aplicación de PCR

PCR plates support reliable evaporation protection

Nota de aplicación | pdf | 6 MB

Characterisation of antibodies with BRAND PCR plates

Nota de aplicación | pdf | 1 MB

seleccionado

Mediante la abreviatura «q!PCR» se identifican los productos desechables para PCR que pueden utilizarse para la PCR cuantitativa en tiempo real. Se trata de artículos blancos o muy transparentes adecuados para la detección sensible de señales de fluorescencia en cicladores en tiempo real.